| Título : |
Avances en el estudio de las funciones de p8 a través del análisis de su localización subcelular y de la identificación de sus proteínas interactoras |
| Tipo de documento: |
documento electrónico |
| Autores: |
Valacco, María Pía. ; Moreno de Colonna, Silvia, ; e-libro, Corp |
| Editorial: |
Universidad de Buenos Aires |
| Fecha de publicación: |
2009 |
| Número de páginas: |
124 p. |
| Palabras clave: |
Biologi�a molecular. Qui�mica biolo�gica. Molecular biology. Biological chemistry. |
| Clasificación: |
572.8 |
| Resumen: |
p8 es una protei�na de 8 kDa que fue identificada en rata debido a su induccio�n durante la fase aguda de la pancreatitis. Los niveles de expresio�n de p8 aumentan en li�neas celulares en respuesta al estre�s y a factores mitoge�nicos. Se postula un rol importante para p8 en la progresio�n tumoral, ya que, al anular su expresio�n en fibroblastos transformados, se inhibe el desarrollo tumoral. El objetivo de este estudio es comprender ma�s profundamente las funciones de p8 asi� como las vi�as celulares en las que esta� involucrada. Un ana�lisis de homologi�a de secuencias nos permitio� identificar a p8 en diferentes especies de eucariotas superiores, y no en eucariotas inferiores. Se encontro� una NLS (senƒal de localizacio�n nuclear) altamente conservada en su secuencia. Ensayos de inmunocitoqui�mica nos permitieron estudiar su localizacio�n subcelular. Observamos que se encuentra nuclear en cultivos de ce�lulas subconfluentes y uniformemente distribuida en toda la ce�lula en cultivos superconfluentes. Su importacio�n al nu�cleo es dependiente de energi�a, y su localizacio�n depende del estadio del ciclo celular, y del estado de acetilacio�n. Demostramos que la NLS de p8 es funcional. p8 es lo suficientemente pequenƒa como para difundir libremente entre el nu�cleo y el citoplasma. Su NLS y el estricto control de su localizacio�n, indican que formari�a parte de complejos multiproteicos. Para profundizar en esta hipo�tesis, identificamos por abordaje proteo�mico las protei�nas que copurifican con p8. A partir de las protei�nas identificadas construimos el interactoma de p8. El ana�lisis de este interactoma indica que p8 es una protei�na multifuncional que puede interactuar con distintas protei�nas con diversas funciones en diferentes compartimentos celulares.
p8 is an 8 kDa protein that was first identified in rat due to its induction during the acute phase of pancreatitis. Various functions related to cell growth control and stress have been attributed to p8. An important role in tumor progression was also assigned to p8 since it was observed that transformed p8-/- fibroblasts do not induce tumors when injected in nude mice. In this study we aim to understand further, the functions of p8 and to find the pathways in which it is involved. Through sequence homology analysis we identified p8 in different species of higher eukaryotes, but not in lower eukaryotes. We saw that there is a highly conserved NLS (Nuclear Localization Signal). Through immunocytochemistry, we found that p8 presents nuclear localization in sub-confluent cells, but it localizes in the cytoplasm of confluent cells. We also observed that nuclear import of p8 is energy dependent, and that its sub- cellular localization changes with the cell cycle stage and the acetylation state of the cells. We proved the functionality of its NLS. p8 is small enough to diffuse between nucleus and cytoplasm passively. The fact that it presents a NLS and a strictly controlled sub-cellular localization suggests that it is forming part of multiprotein complexes. To study this, and to identify the proteins associated to p8 we performed co purification experiments and mass spectrometry analysis. With the identified proteins we built the p8 interactome, and conclude that p8 is a multifunctional protein that is capable of interacting with different proteins associated to different pathways in different cellular compartments. |
| Enlace de acceso : |
https://elibro-net.biblioproxy.umanizales.edu.co/es/lc/umanizales/titulos/85688 |
Avances en el estudio de las funciones de p8 a través del análisis de su localización subcelular y de la identificación de sus proteínas interactoras [documento electrónico] / Valacco, María Pía. ; Moreno de Colonna, Silvia, ; e-libro, Corp . - Universidad de Buenos Aires, 2009 . - 124 p.
| Palabras clave: |
Biologi�a molecular. Qui�mica biolo�gica. Molecular biology. Biological chemistry. |
| Clasificación: |
572.8 |
| Resumen: |
p8 es una protei�na de 8 kDa que fue identificada en rata debido a su induccio�n durante la fase aguda de la pancreatitis. Los niveles de expresio�n de p8 aumentan en li�neas celulares en respuesta al estre�s y a factores mitoge�nicos. Se postula un rol importante para p8 en la progresio�n tumoral, ya que, al anular su expresio�n en fibroblastos transformados, se inhibe el desarrollo tumoral. El objetivo de este estudio es comprender ma�s profundamente las funciones de p8 asi� como las vi�as celulares en las que esta� involucrada. Un ana�lisis de homologi�a de secuencias nos permitio� identificar a p8 en diferentes especies de eucariotas superiores, y no en eucariotas inferiores. Se encontro� una NLS (senƒal de localizacio�n nuclear) altamente conservada en su secuencia. Ensayos de inmunocitoqui�mica nos permitieron estudiar su localizacio�n subcelular. Observamos que se encuentra nuclear en cultivos de ce�lulas subconfluentes y uniformemente distribuida en toda la ce�lula en cultivos superconfluentes. Su importacio�n al nu�cleo es dependiente de energi�a, y su localizacio�n depende del estadio del ciclo celular, y del estado de acetilacio�n. Demostramos que la NLS de p8 es funcional. p8 es lo suficientemente pequenƒa como para difundir libremente entre el nu�cleo y el citoplasma. Su NLS y el estricto control de su localizacio�n, indican que formari�a parte de complejos multiproteicos. Para profundizar en esta hipo�tesis, identificamos por abordaje proteo�mico las protei�nas que copurifican con p8. A partir de las protei�nas identificadas construimos el interactoma de p8. El ana�lisis de este interactoma indica que p8 es una protei�na multifuncional que puede interactuar con distintas protei�nas con diversas funciones en diferentes compartimentos celulares.
p8 is an 8 kDa protein that was first identified in rat due to its induction during the acute phase of pancreatitis. Various functions related to cell growth control and stress have been attributed to p8. An important role in tumor progression was also assigned to p8 since it was observed that transformed p8-/- fibroblasts do not induce tumors when injected in nude mice. In this study we aim to understand further, the functions of p8 and to find the pathways in which it is involved. Through sequence homology analysis we identified p8 in different species of higher eukaryotes, but not in lower eukaryotes. We saw that there is a highly conserved NLS (Nuclear Localization Signal). Through immunocytochemistry, we found that p8 presents nuclear localization in sub-confluent cells, but it localizes in the cytoplasm of confluent cells. We also observed that nuclear import of p8 is energy dependent, and that its sub- cellular localization changes with the cell cycle stage and the acetylation state of the cells. We proved the functionality of its NLS. p8 is small enough to diffuse between nucleus and cytoplasm passively. The fact that it presents a NLS and a strictly controlled sub-cellular localization suggests that it is forming part of multiprotein complexes. To study this, and to identify the proteins associated to p8 we performed co purification experiments and mass spectrometry analysis. With the identified proteins we built the p8 interactome, and conclude that p8 is a multifunctional protein that is capable of interacting with different proteins associated to different pathways in different cellular compartments. |
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